LyoDt® রিয়েল-টাইম পিসিআর ডিটেকশন রিএজেন্ট ফ্রিজ-ড্রাইং পাউডার ক্রোনোব্যাক্টারের জন্য

LyoDt® রিয়েল-টাইম পিসিআর ডিটেকশন রিএজেন্ট ফ্রিজ-ড্রাইং পাউডার ক্রোনোবাকটের জন্য

1.পরিচিতি

ক্রোনোব্যাক্টরএটি একটি নতুনভাবে সংজ্ঞায়িত ব্যাকটেরিয়া প্রজাতি, যার পূর্বসূরী হলএন্টেরোব্যাক্টর সাকাজাকি। ক্রোনোব্যাক্টরএটি একটি গুরুতর খাদ্যবাহিত রোগজীবাণু যা প্রধানত দূষিত শিশু সূত্রের মাধ্যমে প্রেরণ করা হয়, যা নবজাতক মেনিনজাইটিস, সেপসিস এবং নেক্রোটিজিং এন্টেরোকোলাইটিস সৃষ্টি করে। মৃত্যুর হার 80% পর্যন্ত পৌঁছতে পারে।

এই পণ্যটি একটি ফ্রিজ-শুষ্ক রিয়েল-টাইম পিসিআর রিএজেন্ট যাক্রোনোব্যাক্টরএটি অত্যন্ত সংরক্ষিত ওএমপিএ জিন ব্যবহার করেক্রোনোব্যাক্টরএটি একটি মাস্টারমিক্স যা টেমপ্লেট ডিএনএ ব্যতীত সমস্ত প্রয়োজনীয় উপাদান ধারণ করে এবং এটি সহজেই ব্যবহারের জন্য পিসিআর টিউবগুলিতে একক পরীক্ষার জন্য প্রাক-প্রস্তুত করা হয়।এই পণ্য পরিবহন এবং সঞ্চয় করার জন্য ঠান্ডা চেইন প্রয়োজন হয় না, যা শিপিংয়ের খরচ উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করে এবং রিএজেন্ট অপচয় এবং এয়ারোসোল দূষণের সম্ভাব্য ক্ষতি দূর করে।

2. স্পেসিফিকেশন এবং রচনা

3. স্টোরেজ আর শেল্ফ লাইফ

ঘরের তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করুন (5-30°C) এটি 12 মাস পর্যন্ত স্থিতিশীল। ভ্যাকুয়াম প্যাকেজটি খোলার পরে, দয়া করে অব্যবহৃত পণ্যগুলিকে সরবরাহিত পুনরায় সিলযোগ্য প্লাস্টিকের ব্যাগে ডেসিকেন্টগুলির সাথে সংরক্ষণ করুন,এবং অ্যালুমিনিয়াম ফয়েল ব্যাগ.

সতর্কতাঃ

রিএজেন্ট পেল্টের ছোট হওয়া টিউবটিতে আর্দ্রতা প্রবেশের ইঙ্গিত দেয় এবং রিএজেন্টটি ভিজা হয়।ব্যবহারের আগে স্বাভাবিকের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে ছোট পিললেট আকারের যেকোনো রিএজেন্ট ফেলে দেওয়া উচিত অথবা ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণের সাথে পরীক্ষা করা উচিতনমুনা পরীক্ষার জন্য.

4. অতিরিক্ত সরঞ্জাম এবং রিএজেন্ট প্রয়োজন

1) রিয়েল-টাইম পিসিআর যন্ত্র

২) পাইপেট এবং টিপস

3) নিউক্লিয়াজ মুক্ত পানি

4) নিউক্লিক এসিড এক্সট্রাকশন কিট

5. সামঞ্জস্যপূর্ণ রিয়েল-টাইম পিসিআর সিস্টেম

এবিআই ৭৫০০/ফাস্ট, রোচ লাইটসাইক্লার ৪৮০২, বায়োরাড সিএফএক্স৯৬, বায়োর লাইনজিন ৯৬০০।

6. গ্রহণযোগ্য নমুনা

খাদ্য সমৃদ্ধিকর ব্রোথ, বমি, ডায়রিয়া নমুনা ইত্যাদি

7. অপারেশন পদ্ধতি

1) নিউক্লিক এসিড এক্সট্রাকশন

সঠিক এক্সট্রাকশন কিট ব্যবহার করে নমুনা থেকে ডিএনএ বের করুন।এটি সুপারিশ করা হয় যেডিএনএপ্রায় 100μl এলুশন বাফার দিয়ে এলুটেড হয়(টিইঅথবানিউক্লিয়াজ মুক্ত H₂O) শেষ ধাপেনিষ্কাশন.বিশুদ্ধ নিউক্লিক এসিড অবিলম্বে ব্যবহার করা উচিত অথবা -২০°সি তে সংরক্ষণ করা উচিত।

2) পজিটিভ কন্ট্রোল প্রস্তুতি

পজিটিভ কন্ট্রোলটি রিহাইড্রেশনের আগে পরিবেষ্টিত তাপমাত্রায় ১২ মাস পর্যন্ত সংরক্ষণ করা যেতে পারে। এটি ব্যবহারের আগে 250 μl টিই বাফার বা নিউক্লিয়াস মুক্ত এইচ যোগ করে পুনরায় হাইড্রেট করা উচিত₂O, 15-20 সেকেন্ডের জন্য কম গতিতে ঘূর্ণায়মান, এবং 15-20 সেকেন্ডের জন্য কম গতিতে সেন্ট্রিফুগ করা। অবিলম্বে ব্যবহার করুন বা -20 °C এ সংরক্ষণ করুন।

3) রিয়েল টাইম পিসিআর মিশ্রণ প্রস্তুতি

A) ভ্যাকুয়াম প্যাকেজটি খুলুন এবং রিএজেন্ট ধারণকারী 8-টিউব স্ট্রিপগুলি বের করুন। পিললেটটি টিউবের নীচে রয়েছে তা পরীক্ষা করুন (প্রয়োজন হলে টিউবগুলির সংখ্যা কাটা) ।যদি সরবরাহিত টিউব আপনার যন্ত্রের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ না হয়আপনার যন্ত্রের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ একটি অপটিক্যাল টিউবে রিএজেন্ট পেললেটটি স্থানান্তর করুন।

বি) টিউবগুলি খুলুন এবং ক্যাপগুলি (রিয়েল-টাইম পিসিআর মেশিনগুলির জন্য উপযুক্ত নয়) ফেলে দিন এবং নীচের মতো বরফে প্রতিক্রিয়া মিশ্রণটি প্রস্তুত করুন।

ধাপনিষ্কাশন.বিশুদ্ধ নিউক্লিক এসিড অবিলম্বে ব্যবহার করা উচিত অথবা -২০°সি তে সংরক্ষণ করা উচিত।

2) পজিটিভ কন্ট্রোল প্রস্তুতি

পজিটিভ কন্ট্রোলটি রিহাইড্রেশনের আগে পরিবেষ্টিত তাপমাত্রায় ১২ মাস পর্যন্ত সংরক্ষণ করা যেতে পারে। এটি ব্যবহারের আগে 250 μl টিই বাফার বা নিউক্লিয়াস মুক্ত এইচ যোগ করে পুনরায় হাইড্রেট করা উচিত₂O, 15-20 সেকেন্ডের জন্য কম গতিতে ঘূর্ণায়মান, এবং 15-20 সেকেন্ডের জন্য কম গতিতে সেন্ট্রিফুগ করা। অবিলম্বে ব্যবহার করুন বা -20 °C এ সংরক্ষণ করুন।

3) রিয়েল টাইম পিসিআর মিশ্রণ প্রস্তুতি

A) ভ্যাকুয়াম প্যাকেজটি খুলুন এবং রিএজেন্ট ধারণকারী 8-টিউব স্ট্রিপগুলি বের করুন। পিললেটটি টিউবের নীচে রয়েছে তা পরীক্ষা করুন (প্রয়োজন হলে টিউবগুলির সংখ্যা কাটা) ।যদি সরবরাহিত টিউব আপনার যন্ত্রের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ না হয়আপনার যন্ত্রের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ একটি অপটিক্যাল টিউবে রিএজেন্ট পেললেটটি স্থানান্তর করুন।

বি) টিউবগুলি খুলুন এবং ক্যাপগুলি (রিয়েল-টাইম পিসিআর মেশিনগুলির জন্য উপযুক্ত নয়) ফেলে দিন এবং নীচের মতো বরফে প্রতিক্রিয়া মিশ্রণটি প্রস্তুত করুন।

* নিউক্লিয়াজ মুক্ত পানি নেগেটিভ কন্ট্রোল হিসেবে ব্যবহার করা যেতে পারে।

• রিয়েল-টাইম পিসিআর-এর জন্য উপযুক্ত ক্যাপ (স্ট্রিপ) ব্যবহার করে পিসিআর-কে ক্যাপ করুন ((প্রদত্ত নয়) ।

D) 10 ~ 15 সেকেন্ডের জন্য কম গতিতে টিউবগুলিকে ঘূর্ণায়মান করুন এবং 3000rpm এ 20 সেকেন্ডের জন্য সেন্ট্রিফুগ করুন এবং এগুলিকে রিয়েল-টাইম পিসিআর যন্ত্রের মধ্যে রাখুন।

২) আরটি-পিসিআর সেটআপ

প্রতিক্রিয়া ভলিউম 25μl হিসাবে সেট করুন, এবং পিসিআর পরিবর্ধন পদ্ধতি নীচের হিসাবে। 60 °C এ FAM ফ্লুরোসেন্স সংগ্রহ করুন, এবং নিষ্ক্রিয় রেফারেন্স হিসাবে NONE নির্বাচন করুন।

3) ফলাফল বিশ্লেষণ এবং ব্যাখ্যা