Enterocytozoon Hepatopenaei-18s নিউক্লিক অ্যাসিড অ্যামপ্লিফিকেশন মাল্টিপ্লেক্স রিয়েল টাইম পিসিআর

এন্টারোসাইটোজুন হেপাটোপেনাই-18 (EHP-18S) নিউক্লিক অ্যাসিড সনাক্তকরণ কিট

(পিসিআর-ফ্লুরোসেন্ট প্রোব পদ্ধতি)
 
 
উদ্দেশ্যে ব্যবহার:
 
এই কিটটি চিংড়ির ডেসল্ট প্ল্যান্টে লার্ভা কেনার আগে Enterocytozoon hepatopenaei-18S (EHP-18S) এর কোয়ারেন্টাইনের জন্য উপযুক্ত যাতে লার্ভা রোগের জীবাণু বহন করতে না পারে।লিভার এবং অন্ত্রের সাইটিওয়ার্ম প্যারাসাইটাইজেশনের লুকানো বিপদ বাদ দিতে জলজ চাষের উদ্যোগগুলি চিংড়ির ধীর বৃদ্ধির সাথে জলজ চাষের পুকুরের নীচের কাদাতে EHP নির্দিষ্ট সনাক্তকরণ পরিচালনা করেছে।
 
নীতি:
 
এই কিটে, এন্টেরোসাইটোজুন হেপাটোপেনাই -18এস (ইএইচপি-18এস) এর একটি নির্দিষ্ট অংশ ব্যবহার করে একটি প্রাইমার প্রোব ডিজাইন করা হয়েছিল।প্রোবটি বিশেষভাবে প্রাইমার পরিবর্ধন অঞ্চলের মাঝখানে একটি ডিএনএ টেমপ্লেটের সাথে আবদ্ধ হতে পারে।PCR এক্সটেনশন প্রক্রিয়া চলাকালীন, Taq এনজাইমের exonuclease কার্যকলাপ প্রোব থেকে 5'-টার্মিনাল ফ্লুরোফোর কেটে ফেলে এবং প্রতিক্রিয়া সিস্টেমে মুক্ত করে।এইভাবে, 3'-এন্ড quenched গ্রুপ আলাদা করা হয়েছিল, এবং ফ্লুরোসেন্স নির্গত হয়েছিল, যা ফ্লুরোসেন্স পিসিআর যন্ত্র দ্বারা সনাক্ত করা হয়েছিল এবং eHP-18S নিউক্লিক অ্যাসিড সনাক্তকরণ সম্পূর্ণ বন্ধ প্রতিক্রিয়া সিস্টেমে উপলব্ধি করা হয়েছিল।
 
প্রধান উপাদান:
 

 
নমুনা প্রয়োজনীয়তা:
 

1. নমুনার ধরন

চারা: পিতামাতা, চিংড়ি ডিম, চারা, মোটা মান পণ্য

পুকুর: নীচের কাদা, মলমূত্র, জলাশয়

টোপ: লাইভ টোপ, ঠাণ্ডা টোপ এবং অ-উচ্চ-তাপমাত্রা চিকিত্সা টোপ নমুনা

2. পরিবহন

নমুনা সংগ্রহ এবং পরিবহন NY/T 541 অনুযায়ী সম্পন্ন করা হবে। বারবার জমাট বাঁধা এড়াতে রেফ্রিজারেটেড অবস্থায় নমুনাগুলি যত তাড়াতাড়ি সম্ভব পরীক্ষাগারে পাঠানো হবে।

3. নমুনা সংরক্ষণ

এটি 2 ℃ ~ 8 ℃ এ 24 ঘন্টা সংরক্ষণ করা যেতে পারে এবং -20 ℃ এ দীর্ঘ সময়ের জন্য সংরক্ষণ করা যেতে পারে।

 
Micgene 242/244/244IVD এবং ABI QuantStudio5 ব্যবহার করে:
 
পদ্ধতি নিম্নরূপ সেট করা হয়:

সনাক্তকরণ চ্যানেলের জন্য FAM নির্বাচন করা হয়েছিল।
 
ব্যাখ্যার ফলাফল

দ্রষ্টব্য: ফলাফলটি ধূসর এলাকা হিসাবে বিচার করা হয়, যা পুনরায় পরীক্ষা করা প্রয়োজন।পুনঃনিরীক্ষার ফলাফল যদি Ct মান < 45 ধনাত্মক হিসাবে বিবেচিত হয় এবং কোন Ct মান বা Ct মান ≥45 ঋণাত্মক হিসাবে বিবেচিত হয় না।
 
ফলাফল বিশ্লেষণ:
যন্ত্র ব্যবহার করে স্বয়ংক্রিয় বিশ্লেষণ
 
মান নিয়ন্ত্রণ:
নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ: FAM সনাক্তকরণ চ্যানেলের কোন সুস্পষ্ট পরিবর্ধন বক্ররেখা নেই;
ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ: FAM চ্যানেল সুস্পষ্ট পরিবর্ধন বক্ররেখা দেখিয়েছে, Ct মান ≤30;
 
উপরের শর্তগুলি একই পরীক্ষায় একই সাথে পূরণ করা হয়;অন্যথায়, পরীক্ষাটি অবৈধ এবং পুনরায় পরীক্ষা করা প্রয়োজন।