LyoDt® হিমায়িত-শুকনো পাউডার রিয়েল-টাইম পিসিআর ডিটেকশন রিএজেন্ট, যা Vibrio cholerae O1 সনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয় - কোনো কোল্ড চেইন-এর প্রয়োজন নেই এবং একক-পরীক্ষার জন্য পূর্ব-নির্ধারিত

LyoDt^® ফ্রিজ-ড্রাইড রিয়েল-টাইম পিসিআর শনাক্তকরণ বিকারক O1

ব্যবহার’s ম্যানুয়াল

১। বর্ণনাVibrio cholerae

O1।টি 

এর জন্যশনাক্তকরণ Vibrio cholerae O1টি rfb জিন ব্যবহার করে  Vibrio cholerae O1 এটি একটি মাস্টারমিক্স যাতে টেমপ্লেট ডিএনএ বাদে প্রয়োজনীয় সমস্ত উপাদান রয়েছে এবং এটি সহজে ব্যবহারের জন্য পিসিআর টিউবে একক-পরীক্ষা হিসাবে প্রি-ডিসপেন্স করা হয়। এই পণ্যের পরিবহন এবং সংরক্ষণের জন্য কোল্ড চেইনের প্রয়োজন হয় না, যা শিপিং খরচ উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করে এবং বিকারক অপচয় এবং অ্যারোসল দূষণ দ্বারা সম্ভাব্য ক্ষতি দূর করে। ২। স্পেসিফিকেশন ও গঠন

ক্যাট নং।

এবং মেয়াদ শেষ হওয়ার তারিখ সংরক্ষণ করুন

 ঘরের তাপমাত্রায়(৫-৩০ °C৪উপাদানটি ।টি এবং অ্যালুমিনিয়াম ফয়েল ব্যাগে।সতর্কতা: 

বিকারক ছোট হওয়া টিউবের মধ্যে আর্দ্রতা প্রবেশ করার ইঙ্গিত এবং বিকারকটি স্যাঁতসেঁতে। স্বাভাবিকের চেয়ে উল্লেখযোগ্যভাবে ছোট আকারের যেকোনো বিকারক বাতিল করা উচিত বা নমুনা পরীক্ষার জন্য ব্যবহারের আগে পজিটিভ কন্ট্রোল দিয়ে পরীক্ষা করা উচিত 

।    ৪। অতিরিক্ত সরঞ্জাম ও বিকারক প্রয়োজন১) 

রিয়েল-টাইম পিসিআর যন্ত্র

এপাইপ

।  এবং টিপস৩) নিউক্লিয়েজ

ক্স মুক্ত জল৪) নিউক্লিক অ্যাসিড নিষ্কাশন কিট

ধাপABI 7500/Fast, Roche LightCycler 480II, BioRad CFX96, Bioer LineGene 9600

।

৬। গ্রহণযোগ্য নমুনাটি

৭। অপারেশন পদ্ধতি

১) 

নিউক্লিক

এসিড nterpretationxtractionনমুনা থেকেDNA

নিষ্কাশন করুন একটি উপযুক্ত নিষ্কাশন কিট ব্যবহার করে। সুপারিশ করা হয় যে DNA প্রায় 100μl এল্যুশন বাফার দিয়ে এলুট করা হোক (TEপ্রয়োজনীয়নিউক্লিয়েজ-মুক্ত H 2O_°C নিষ্কাশনের চূড়ান্ত ধাপে। উপাদান২) পজিটিভ কন্ট্রোল প্রস্তুতি২৫০ ১২ মাস পর্যন্ত

। এটি

 ব্যবহারের আগে পুনরায় জলযোজন করা উচিত  যোগ করে ২৫০ μl TE বাফার বা nuclease-free H2O, কম গতিতে ১৫-২০ সেকেন্ডের জন্য vortex করুন এবং কম গতিতে ১৫-২০ সেকেন্ডের জন্য সেন্ট্রিফিউজ করুন। অবিলম্বে ব্যবহার করুন বা সংরক্ষণ করুন -20_°C।৩) রিয়েল-টাইম পিসিআর ৪টি

ক্স পিreparationক) ভ্যাকুয়াম প্যাকেজটি খুলুন এবং বিকারকযুক্ত ৮-টিউব স্ট্রিপটি বের করুনগুলি বের করুন। টিউবের নীচে পেললেট আছে কিনা তা পরীক্ষা করুন

(প্রয়োজন অনুযায়ী টিউবের সংখ্যা কাটুনযদি  প্রয়োজনীয়) । যদি প্রদত্ত টিউবগুলি আপনার যন্ত্রের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ না হয়, তবে বিকারক পেললেটটিকে আপনার যন্ত্রের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ একটি অপটিক্যাল টিউবে স্থানান্তর করুন।খ) টিউবগুলি খুলুন এবং ক্যাপ(গুলি) ফেলে দিন (রিয়েল-টাইম পিসিআর মেশিনের জন্য উপযুক্ত নয়), এবং নীচের হিসাবে বরফের উপর বিক্রিয়া মিশ্রণ প্রস্তুত করুন।উপাদানভোল। /পরীক্ষা

ফ্রিজ-ড্রাইড বিকারক

ঘ) কম গতিতে ১০~১৫ সেকেন্ডের জন্য টিউবগুলি vortex করুন এবং ৩০০0rpm-এ ২০ সেকেন্ডের জন্য সেন্ট্রিফিউজ করুন এবং সেগুলিকে একটি রিয়েল-টাইম পিসিআর যন্ত্রে রাখুন।

৪) আরটি-পিসিআর সেটআপবিক্রিয়ার পরিমাণ ২৫μl হিসাবে সেট করুন এবং নীচের হিসাবে পিসিআর অ্যামপ্লিফিকেশন পদ্ধতি সেট করুন। 60°C-এ FAM

ফ্লুরোসেন্স সংগ্রহ করুন এবং প্যাসিভ রেফারেন্স হিসাবে NONE নির্বাচন করুন।

ধাপতাপমাত্রা

সময় চক্র

এবং আইnterpretation  টেমপ্লেটসিটিব্যাখ্যা